Sterilisasi Alat (Tanpa Gambar)

STERILISASI

(Laporan Praktikum Mikrobiologi Pertanian)

Oleh

Tety Maryenti

1014121179

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS LAMPUNG

2010

________________________________________________________________________

I. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sterilisasi adalah istilah mengacu pada setiap proses yang menghilangkan (menghapus) atau membunuh semua bentuk kehidupan, termasuk agen menular (seperti jamur , bakteri , virus , bentuk spora, dll) hadir pada permukaan , yang terkandung dalam cairan, dalam pengobatan, atau dalam senyawa seperti media kultur biologis. Sterilisasi dapat dicapai dengan menggunakan kombinasi yang tepat dari panas, bahan kimia, iradiasi, tekanan tinggi, dan filtrasi. Terdapat 3 macam sterilisasi yaitu secara mekanik, fisik, maupun kimia.

Dalam laboratorium, hal utama yang harus diperhatikan setiap orang adalah bekerja secara aseptik. Peralatan dan juga bahan yang digunakan dalam laboratorium mikrobiologi harus dalam keadaan steril atau tidak terkontaminasi dengan virus, bakteri, dan mikrobiologi. Untuk mensterilkannya, dibutuhkan pengetahuan tentang teknik-teknik sterilisasi, karena peralatan dalam laboratorium memiliki teknik sterilisasi yang berbeda-beda.Oleh karena itu, tentu diperlukan pula pengenalan akan alat-alat laboratorium mikrobiologi serta teknik / cara penggunaan alat-alat yang berhubungan dengan penelitian tersebut .Hal ini dilakukan untuk memudahkan berlangsungnya suatu penelitian.

1.2 Tujuan

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah:

1. Melatih mahasiswa bekerja di dalam laboratorium secara aseptik
2. Melatih mahasiswa untuk mensterilkan meja kerja

3. Melatih mahasiswa untuk menuangkan suatu media

4. Memahami prinsip kerja dan fungsi dari alat sterilisasi

5. Menggambar masing-masing alat yang digunakan

_______________________________________________________________________

II. TINJAUAN PUSTAKA

Sterilisasi adalah istilah mengacu pada setiap proses yang menghilangkan (menghapus) atau membunuh semua bentuk kehidupan, termasuk agen menular (seperti jamur , bakteri , virus , bentuk spora, dll) hadir pada permukaan , yang terkandung dalam cairan, dalam pengobatan, atau dalam senyawa seperti media kultur biologis. Sterilisasi dapat dicapai dengan menggunakan kombinasi yang tepat dari panas , bahan kimia , iradiasi , tekanan tinggi , dan filtrasi. (Wikipedia Bahasa Indonesia 2008)

Ilmu pengetahuan yang mempelajari tentang mikroorganisme tersebut yang disebut dengan mikrobiologi. Para peniliti mulai mencari tahu akan apa yang terkandung pada mikroorganisme.Dalam bidang penelitian mikroorganisme ini, tentunya menggunakan teknik atau cara- cara khusus untuk mempelajarinya serta untuk bekerja pada skala laboratorium untuk meneliti mikroorganisme ini baik sifat dan karakteristiknya, tentu diperlukan pula pengenalan akan alat-alat laboratorium mikrobiologi serta teknik / cara penggunaan alat-alat yang berhubungan dengan penelitian tersebut .Hal ini dilakukan untuk memudahkan berlangsungkan suatu penelitian. (Wikipedia Bahasa Indonesia 2009)

_________________________________________________________

III. METODE PERCOBAAN

3.1 Alat dan Bahan

Adapun peralatan yang digunakan dalam praktikum ini adalah laminar air flow, cawan petri, labu erlenmeyer, lampu bunsen, oven, alcohol semprot, alumunim foil, kertas koran/ HVS bekas, PDA (Potato Dextrose Agar), dan tissue

3. 2 Prosedur Kerja

1. Mahasiswa diberikan penjelasan dan peragaan tentang langkah-langkah bekerja secara aseptik.

2 Mahasiswa diberikan kesempatan mencoba setiap langkah yang sudah diajarkan, antara lain :

a. Cara mensterilkan meja kerja

b. Cara menuangkan media dari tabung reaksi ke dalam cawan petri

c. Cara menuangkan media labu Erlenmeyer ke cawan petri

d. Cara memindahkan biakan dari tabung reaksi ke tabung reaksi atau cawan petri

e. Cara memindahkan biakan dari cawan petri ke tabung reaksi atau cawan petri

f. Cara memindahkan larutan dengan menggunakan pipet (pipetting)

____________________________________________________________

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4 4.1 Hasil Pengamatan

Hasil pengamatan yang didapatkan pada percobaan ini adalah

No	Gambar Alat	Fungsi Alat
1		Laminar air flow berfungsi sebagai tempat bekerja secara aseptis dan steril, karena mempunyai pola pengaturan dan penyaringan aliran udara sehingga aseptis dan aplikasi sinar UV beberapa jam sebelum digunakan.
2		Cawan Petri berfungsi sebagai wadah/media untuk pertumbuhan suatu mikroorganisme
3		Labu Erlenmeyer berfungsi sebagai penampung larutan kimia atau larutan yang dijadikan stock medium
4		Lampu Bunsen berfungsi untuk menciptakan kondisi yang steril atau memanaskan larutan
5		Oven berfungsi untuk mensterilkan alat- alat gelas yang tahan terhadap panas. Digunakan pada sterilisasi udara kering dengan membebaskan alat- alat dari segala macam kehidupan (mikroba) tanpa kelembaban
6		Alcohol semprot berfungsi untuk mesterilkan tangan dan meja kerja
7		Alumunim foil berfungsi untuk
8		Kertas koran/ HVS bekas berfungi untuk
9		PDA (Potato Dextrose Agar) berfungsi untuk
10		Tissue berfungsi untuk membersihkan alcohol di meja kerja

4.2 Pembahasan

Sterilisasi terdiri dari 3 macam yaitu secara mekanik , fisik, dan kimia. Dalam praktikum kali ini, dilakukan sterilisasi secara fisik saja, yang menggunakan alat sterilisasi yaitu laminar air flow, lampu Bunsen, cawan Petri, dan oven.

Hal yang dilakukan dalam praktikum ini adalah :

1. Mensterilkan meja kerja
2. Menuangkan media

Terdapat langkah-langkah dalam mesterilkan meja kerja yaitu :

1.Menyemprotkan alcohol di meja kerja

2. kemudian di lap menggunakan tissue

Terdapat langkah-langkah dalam menuangkan media yaitu :

1. Menyemprotkan alcohol ke tangan agar steril.
2. Menyalakan Bunsen yang berfungsi mematikan mikroorganisme di udara agar mikroorganisme tidak masuk kedalam media.

3. Menyiapkan cawan Petri yang sudah dalam keadaan steril.

Cara mensterilkan cawan Petri :

1. Cawan Petri disusun terlebih dahulu
2. Kemudian ditutup atau dibungkus dengan koran

3. Lalu dibungkus dengan alumunium foil atau plastic tahan panas

4. Kemudian masukkan ke oven

Langkah ketika lat sterilisasi berada di dalam laminar air flow :

1. Buka cawan Petri sedikit
2. Kemudian bawa ke dekat lampu Bunsen

3. Tuang PDA yang merupakan media

4. Kemudian taruh di dekat api, agar meminimalisir kontaminasi

5. Ketika cawan Petri dalam keadaan pans, janganlah segera ditutup, karena ditakutkan uap air menetes ke media PDA (Potato Dextrose Agar)

___________________________________________________________

V. KESIMPULAN

Kesimpulan yang dapat diambil dari hasil pengamatan yang telah dilakukan adalah :

1. Setiap alat memiliki fungsi masing masing dalam sterilisasi.
2. Laminar air flow dan lampu Bunsen merupakan bagian alat sterilisasi secara fisik
3. Ketika bekerja di laboratorium haruslah dengan steril atau aseptic, sehingga hasil yang kita inginkan akan baik.

___________________________________________________________

DAFTAR PUSTAKA

Anonym, 2008 , http://wikipediabahasaindonesia/.htm .diakses pada tanggal 04 Maret 2011, 19.45, Bandar Lampung.

Anonym, 2009, http// wikipediabahasaindonesia/.htm . diakses pada tanggal 04 maret 2009, 19.50, Bandar Lampung.

tolong dikasih komen ya kawan :D untuk memperbaiki blog ini :D gomawoyo :D

and please join this site :D kamsahamnida :D
bye bye

Read More

Pembuatan Media PDA (Tanpa Gambar)

PEMBUATAN MEDIA PDA

(Laporan Praktikum Mikrobiologi Pertanian)

Oleh

Tety Maryenti

1014121179

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS LAMPUNG

2011

__________________________________________________

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Populasi mikroba di alam sekitar kita sangat besar dan kompleks. Untuk menelaah mikroba tersebut, kita harus dapat menumbuhkan atau mengembangkannya. Media diperlukan untuk menumbuhkan dan mengembangkan suatu mikroorganisme. Media biakan adalah bahan atau campuran bahan yang dapat digunakan untuk membiakkan mikroorganisme, karena memiliki daya dukung yang tinggi terhadap pertumbuhan dan perkembangbiakkannya. Pertumbuhan bakteri selain memerlukan nutrisi, juga memerlukan pH yang tepat. Kebanyakan bakteri tidak dapat tumbuh pada kondisi yang terlalu basa Adanya pembiakan bakteri dan jamur dimaksudkan untuk memudahkan pemeriksaan yang akan dilakukan di dalam laboratorium, sehingga jika sewaktu-waktu kita memerlukan bakteri dan jamur untuk suatu percobaan, maka bakteri dan jamur tersebut telah tersedia. Biakkan bakteri dan jamur tersebut dapat disimpan di dalam lemari es untuk waktu yang lama tanpa ada kerusakan.

Potato Dextrose Agar merupakan salah satu media yang banyak digunakan untuk membiakkan suatu mikroorganisme, baik itu berupa cendawan/fungi, bakteri, maupun sel makhluk hidup. Potato Dextrose Agar merupakan paduan yang sesuai untuk menumbuhkan biakan. Karena ekstrak potato (kentang) merupakan sumber karbohidrat, dextrose (gugusan gula, baik itu monosakarida atau polysakarida) sebagai tambahan nutrisi bagi biakan , sedangkan agar merupakan bahan media/tempat tumbuh bagi biakan yang baik, karena mengandung cukup air.

B. TuB. Tujuan

Adapun tujuan dari percobaan ini adalah :

1. Agar mahasiswa memahami dan mengetahui cara pembuatan media PDA

2. Agar mahasiswa terampil dalam pembuatan media PDA.

____________________________________________________

II. TINJAUAN PUSTAKA

Sebelum menumbuhkan mikroorganisme dengan sebaik-baiknya, pertama-tama anda harus dapat memahami kebutuhan dasarnya lalu mencoba memformulasikan suatu medium yang memberikan hasil yang terbaik. Yang dimaksud dengan medium disini adalah bahan yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme diatas atau didalamnya. Sebenarnya tidak ada satu macam medium pun yang cocok untuk setiap cendawan berbeda-beda. Beberapa cendawan dapat tumbuh dengan baik pada setiap macam medium yamg mengandung beberapa bahan organik, cendawan yang lain memerlukan zat-zat kimia tertentu (Hadiotomo,1993).

Pertumbuhan bakteri selain memerlukan nutrisi, juga memerlukan pH yang tepat. Kebanyakan bakteri tidak dapat tumbuh pada kondisi yang terlalu basa, kecuali Vibrio cholerae yang dapat hidup pada pH lebih dari 8. Suhu juga merupakan variabel yang perlu dikendalikan. Kelompok terbesar yaitu mesofil, suhu optimum untuk pertumbuhannya 20-40^oC (Volk, 1993).

PH merupakan faktor yang sangat mempengaruhi suatu keberhasilan dalam pembuatan medium sehingga kondisi pH yang terlalu basa atau terlalu asam tidak cocok untuk dijadikan medium mikroba karena mikroba tidak dapat hidup pada kondisi tersebut. Medium didiamkan atau disimpan selama 2 x 24 jam untuk menyakinkan bahwa medium masih steril, karena selain pH sebagai penentu tumbuhnya mikroba, alat dan medium yang steril juga menentukan (Dwidjoseputro, 1994).

Memformulasikan suatu medium atau bahan yang akan digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme di dalamnya harus memperhatikan berbagi macam ketentuan seperti jika yang ingin kita membuat medium untuk organisme bersel tunggal, biasanya air sangat penting sebagai komponen utama protoplasmanya serta untuk masuknya nutrien ke dalam sel. Pembuatan medium agar padat, digunakan agar-agar, gelatin atau gel silika. Bahan agar yang utama adalah galaktan (komplek karbohidrat yang diekstrak dari alga genus Gelidium). Agar akan larut atau cair pada suhu hampir 100^oC dan akan cair apabila kurang lebih 43^oC (Hadioetomo, 1993).

Pembuatan medium Potato Dextrose Agar (PDA), kentang sudah ditimbang dan direbus. Disini menggunakan agar untuk mengentalkan medium. Ekstrak kentang dan agar disetir dan diatur suhu dan pHnya. Sebelum dilakukan sterilisasi, medium berawarna kuning, setelah disterilisasi dalam autoklaf medium berwarna kecoklatan dan didapat endapan berwarna putih. Setelah didinginkan beberapa saat, medium dapat ditanami bakteri (Schegel, 1993).

____________________________________________________

III.METODOLOGI PERCOBAAN

A Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung reaksi, pisau, kentang, timbangan, kompor, gelas ukur, panci, cawan petri, kapas, erlenmayer, autoklaf, batang penyedok, dextrose, agar, dan aquades.

B Prosedur Kerja

Cara pembuatan media PDA :

1. Menyiapkan alat dan bahan dalam pembuatan media PDA

2. Menyiapkan kentang 50 gram, dextrose 5 gram, air destilasi 250 ml, dan agar batangan 5 gram

3. Memotong kentang menjadi beberapa bagian, kentang tersebut direbus dengan air 250 ml di kompor sampai airnya keruh dan mengeluarkan sari-sarinya

4. Sari-sari kentang atau kaldu kentang dimasukkan kedalam tabung Erlenmeyer ukuran 250 ml

5. Dimasukkan agar sedikit demi sedikit sambil diaduk begitupula larutan dextrose atau gula agar tidak menggumpal

6. Tabung Erlenmeyer ditutup dengan alumunium foil, diikat dengan karet gelang

7. Dimasukkan di autoclave dengan tekanan 2 ATM atau 121°C.

Cara sterilisasi cawan petri :

1. Cawan petri yang akan disterilkan diambil

2. Sediakan koran secukupnya.

3. Letakkan cawan perti di atas koran dengan posisi cawan tepat berada pada tengah koran.

4. Satukan antara sisi yang satu dengan sisi yang lain.

5. Lipat koran ke satu arah hingga tidak ada udara yang masuk.

6. Setelah dilipat, balik posisi koran yang awalnya diatas menjadi dibawah lalu bagian atasnya dilipat tiap ujungnya.

7. Setelah dibungkus, masukkan bungkus cawan ke dalam plastic anti panas lalu diikat dengan karet hingga dipastikan tidak ada yang masuk.

8. Masukkan cawan yang telah dibungkus ke dalam autoklaf 15⁰ C selama 2 jam.

_____________________________________________________

IV.HASIL DAN PEMBAHASAN

A Hasil Pengamatan

No			Gambar	Keterangan
1				Gambar disamping merupakan bahan pembuat media PDA yaitu erlenmayer, kentang, agar, dextrose,dan alumunium foil.
2				Setelah dicuci dan dikupas, kentang ditimbang 50 gr dengan menggunakan timbangan
3				Lalu kentang dipotong menjadi dadu dan kemudian kentang direbus bersama air destilasi sebanyak 250 ml. Tunggu hingga sarinya atau kaldunya keluar.
4						Lalu masukkan sari- sari kentang kedalam tabung Erlenmeyer yang bervolume 250 ml.
5						Agar dipotong berukuran kecil agar dapat dimasukkan kedalam tabung Erlenmeyer bersamaan dengan gula atau dextrose.
6						Kemudian masukkan agar dan dextrose sebanyak masing-masing 5 gr sedikit demi sedikit, masukkan ke dalam erlenmayer sambil diaduk.
7						Setelah dimasukkan ke dalam erlenmayer, tutup tabung tersebut dengan alumunium foil.
8					Kemudian tabung Erlenmeyer yang telah ditutupi alumunium foil, dimasukkan ke dalam plastic tahan panas.
9					Setelah itu, sterilkan dengan menggunakan autoklaf dengan tekanan 2 ATM atau 121°C.

B Pembahasan

Media adalah suatu substrat tempat tumbuh berkembangnya mikroorganisme dalam suatu kehidupan.

Substrat adalah nutrisi yang dibutuhkan mikroorganisme seperti bakteri dan jamur.

Medium adalah jika suatu mikroorganismebisa tumbuh dan berkembang dalam suatu media.

Berdasarkan kegunaanya, PDA dibagi menjadi 3 yaitu

a. Media umum : global, misalanya dari semua jamur maupun bakteri dapat digunakan

b. Media pembeda : dapat membedakan antara aspergillus dan lactobacillus

c. Media sebagian : digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme tetapi tidak secara keseluruhan.

Berdasarkan komposisinya :

a. Alami : tanpa campur tangan manusia seperti jagung, telur

b. Semi sintetik : secara kimia, tetapi tidak keseluruhan kmia , ada sebagian tidak

c. Sintetik : dapat dilihat secara keseluruhan secara kimia seprti kalium klorida, kalium posfat, dan natrium nitrat.

Berdasarkan konsistensinya :

a. Cair : biasanya digunakan jamur untuk pengembangbiakkan secara besar.

b. Padat : pembuatan PDA, diberikan agar-agar dengan konsentrasi 15-20 gr/liter

c. Setengah padat : pembuatan PDA, contohnya dengan menambahkan agar-agar dengan konsentrasi rendah 5-10 gr/liter.

Pertanyaan :

1. Kenapa perlu membuat PDA ?

2. Kenapa dalam pembuatan PDA menggunakan kentang dan gula ?

3. Selain kentang, adakah bahan lain yang bisa membuat media ?

Jawaban :

1. Karena agar kita mengetahui cara tumbuh dan berkembangnya mikroorganime yang kita telaah.

2. Karena kentang dan gula memiliki kandungan karbohidrat yang baik untuk pertumbuhan tanaman.

__________________________________________________

V. KESIMPULAN

Kesimpulan yang dapat diambil dari hasil pengamatan yang telah dilakukan adalah:

1. Media biakan berfungsi untuk memberikan tempat dan kondisi yang mendukung pertumbuhan dan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang ditumbuhkan.

2. PDA merupakan media penumbuhan mikroorganisme yang sangat efektif, hal tersebut dikarenakan sebagian besar mikroorganisme dapat tumbuh dan berkembang di dalam media tersebut dalam.

3. Media dibagi menjadi 3 berdasarkan kegunaannya, yaitu media umum, media pembeda , dan media sebagian.

4. Media dibagi menjadi 3 berdasarkan komposisinya, yaitu alami, semi sintetik dan sintetik

5. Media dibagi menjadi 3 berdasarkan konsistensinya, yaitu cair, padat, dan setengah padat.

____________________________________________________

DAFTAR PUSTAKA

Hadioetomo, Ratna Siri. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. PT Gramedia Pustaka Utama : Jakarta

Volk , W. A & Wheeler. M. F. 1993. Mikrobiologi Dasar Jilid 1 Edisi ke 5. Erlangga, Jakarta.

Dwidjoseputro, D. 1994. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan, Jakarta.

Hadioetomo, R.S. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. Gramedia, Jakarta.

Schegel, G.H. 1993. General Microbiologi seventh edition. Cambrige University Press, USA.

___________________________________________________________

tolong dikasih komen ya kawan :D untuk memperbaiki blog ini :D gomawoyo :D

and please join this site :D kamsahamnida :D
bye bye

Read More